MiCAN-cMylc（コロナウイルス最適化骨髄系細胞）キット

[完全なプロトコルは購入とリクエストに応じて利用可能です]

1.培地の調製

50uLのサプリメントを10mLの10％FBS / aMEMに加えます。残りのサプリメントは4℃で2週間保存できます（再凍結と解凍はお勧めしません）。

2.cMylc細胞の調製

凍結保存されたfrozonバイアル内のcMylcは、37℃のウォーターバスで急速に解凍され、すぐに室温で10％FBS / aMEMに懸濁されます。

3.cMylcの細胞培養

遠心分離（300G、室温で5分間）後、細胞ペレットを10 mLの10％FBS / aMEMに、5％CO2（95％空気）下37℃の加湿雰囲気で2日間再懸濁します。

2日後、細胞は上記の条件で分配されます。細胞ペレットを「サプリメントB」を含む10mLの10％FBS / aMEMに再懸濁し、低細胞結合T-25フラスコ内で37℃で3日間インキュベートします。ウイルス感染に理想的なcMylc-DCは、実験の準備ができています。

4.ビリス感染

cMylc-DCは、SARS-CoV-2ウイルスと混合するために96ウェル細胞培養プレートで調製されます。混合の4時間後、接種材料を各ウェルから完全に除去し、次に10％FBS / aMEMを添加します。子孫ウイルスは、定量的RT-PCRで3日後に上清で検出可能です。